微型生物反應(yīng)器作為高通量篩選、菌種優(yōu)化與工藝開發(fā)的核心工具，廣泛應(yīng)用于合成生物學(xué)、制藥研發(fā)及發(fā)酵工程領(lǐng)域。其以小體積、高精度控制和并行化操作優(yōu)勢，顯著提升實驗效率。若操作不規(guī)范，易導(dǎo)致染菌、參數(shù)漂移、溶氧不足或細(xì)胞損傷，影響數(shù)據(jù)可靠性。遵循
微型生物反應(yīng)器無菌化、標(biāo)準(zhǔn)化、智能化的操作流程，是實現(xiàn)控得精、養(yǎng)得穩(wěn)、測得準(zhǔn)的前提。
一、使用前準(zhǔn)備
系統(tǒng)滅菌：
反應(yīng)罐體、管路及傳感器接口須經(jīng)高壓蒸汽滅菌（121℃,20min）或在線SIP（在位滅菌）；
pH/DO電極使用前活化（DO膜更換、pH電極浸泡于緩沖液）；
參數(shù)校準(zhǔn)：
pH校準(zhǔn)：用標(biāo)準(zhǔn)緩沖液（pH4.01、7.00）兩點校正；
DO校準(zhǔn)：零點（亞*溶液）與滿度（空氣飽和水）校準(zhǔn)；
培養(yǎng)基準(zhǔn)備：
過濾除菌（0.22μm）或同步滅菌，避免沉淀堵塞補(bǔ)料管。
二、規(guī)范接種與運(yùn)行流程
接種操作：
在生物安全柜中進(jìn)行，火焰灼燒接種口，快速注入種子液（通常5–10%v/v）；
參數(shù)設(shè)定：
根據(jù)菌種需求設(shè)置：
溫度（如大腸桿菌37℃，酵母30℃）；
攪拌轉(zhuǎn)速（200–1000rpm，避免剪切力損傷細(xì)胞）；
通氣量（0.1–1vvm），搭配氣體混合調(diào)控DO與pH；
實時監(jiān)控：
啟用自動反饋控制：DO低于設(shè)定值時自動提轉(zhuǎn)速或增氧；pH偏離時觸發(fā)電動泵補(bǔ)酸/堿。
三、使用后處理
實驗結(jié)束，先關(guān)閉加熱與攪拌，再停氣；
排空廢液，用去離子水沖洗內(nèi)壁，防止殘留物干結(jié)；
pH/DO電極按規(guī)范保存（pH電極存于3MKCl，DO膜干燥避光）；
導(dǎo)出全過程數(shù)據(jù)（OD、pH、DO、溫度曲線），生成合規(guī)報告。
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更新時間：2026-02-02
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